菌種 保藏法 : : :tongpaibio
保藏:立即將預凍后的冷凍管轉移至處于液氮中的儲存器中，置于液態氮的氣相或液相保藏。一般氣相中溫度為－150℃，液相中溫度為－196℃。用此法可保藏酵母菌5～8年。
ATCC細胞,傳代細胞,菌種
恢復培養:將冷凍管立即放置38～40℃水浴中復蘇并適當快速搖動，直到內部結冰全部溶解為止，整個復蘇過程約需50～100秒。
用75%酒精棉擦拭冷凍管。將冷凍管蓋子旋開，無菌條件下將內容物轉移至麥芽汁或其它適宜培養基上，28～30℃或適溫下培養。
注意事項:
操作時要注意安全，帶防護面罩和手套，防止凍傷。
冷凍管于液相中存放時一定要擰緊螺帽。
運送液氮時要用特制的容器，絕不可用密閉容器存放或運輸液氮，切勿使用保溫瓶存放液氮。
注意存放液氮容器的室內通風，防止過量氮氣使人窒息。
防止冷凍管破裂爆炸，如液氮滲入管內，當從液氮容器取出時，液態氮體積膨脹約680
倍，爆炸力很大，要特別小心。
注意觀察液氮容器中液氮的殘存量，定期補充液氮。
菌種 保藏法 液氮超低溫凍結法
安瓿管或冷凍管的準備:
將1.8mL冷凍管洗凈，晾干.激光打印標簽，標簽上標明菌株編號和保藏日期，大小約為10×20mm，標簽在管內的位置應距離管底約10mm左右，標簽上有字的一面面向管壁。也可直接將菌株編號和保藏日期直接噴碼在冷凍管表面。塞好棉塞或旋上蓋子，121℃蒸汽滅菌15～20分鐘，60℃烘干備用。
菌種 保藏法 保護劑的準備:選用分析純甘油制備保護劑。用蒸餾水配制10%的甘油溶液作為保護劑， 每支試管分裝5mL，121℃蒸汽滅菌15～20分鐘。
保藏培養物的準備:斜面培養物的制備，要求培養至靜止期或成熟期。無菌條件下將滅過菌的10%甘油5mL用無菌吸管注入到培養好的斜面中，用吸管刮取斜面上的菌體，注意不要將培養基刮破。將菌體與保護劑混勻后用吸管注入到冷凍管內，每支分裝約1mL，菌懸液中細胞濃度應不低于106個/mL。將冷凍管蓋子旋緊后放入凍結器內。
預凍:可采用以下兩種方式進行預凍：將控溫系統先預冷到4℃，再將盛有保藏物的冷凍管放入其中，以每分鐘1℃的降溫速率使溫度降至－35℃。將冷凍管置－20℃至－40℃冰箱中冷凍，1～2小時取出放入液氮罐中快速冷凍，這樣冷凍速率大約每分鐘下降1～1.5℃。
