組織/細(xì)胞裂解液重要特點(diǎn)以及選擇指南（MKBIO）

2018年10月04日 23:23上海懋康生物科技有限公司點(diǎn)擊量：952

前言：

在免疫印跡（WB）、免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP），以及染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）等許多研究組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)，蛋白純化以及蛋白-蛋白、蛋白-核酸間互作的各種免疫實(shí)驗(yàn)內(nèi)，首先要做的步就是進(jìn)行組織（細(xì)胞）裂解，通過破壞細(xì)胞膜或細(xì)胞核膜的屏障，將要待研究的對象釋放到體外環(huán)境中。為此，擁有合適的組織/細(xì)胞裂解液是開展實(shí)驗(yàn)重要的一環(huán)。

針對各種下游實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)，懋康生物（MKBio）提供幾種常見的組織/細(xì)胞裂解液，基本涵蓋用戶需求。

總表：各種組織/細(xì)胞裂解液主要特點(diǎn)和應(yīng)用差異（MKBIO）

產(chǎn)品貨號	MP1501	MP1502	MP1503	MP1504	MP1505	MP1506	MP1507	MP1508
產(chǎn)品名稱	RIPA裂解液（強(qiáng)）	RIPA裂解液（中）	RIPA裂解液（弱）	WB/IP裂解液	NP-40裂解液	SDS裂解液	RIPA裂解液（強(qiáng)，無抑制劑）	WB/IP裂解液（無抑制劑）
有效裂解成分	1% Triton X-100，1%脫氧膽酸鈉，0.1% SDS	1% NP-40，0.5%脫氧膽酸鈉，0.1% SDS	1% NP-40，0.25%脫氧膽酸鈉	1% Triton X-100	1% NP-40	1% SDS	1% Triton X-100，1%脫氧膽酸鈉，0.1% SDS	1% Triton X-100
裂解強(qiáng)度	強(qiáng)	中	溫和	溫和	溫和	強(qiáng)	強(qiáng)	溫和
對膜蛋白的提取	很好	較好	一般	一般	一般	很好	很好	一般
對胞漿蛋白的提取	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好
對核蛋白的提取	很好	較好	較好	較好	較好	很好	很好	較好
胞漿磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好
核轉(zhuǎn)錄因子提取	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好
蛋白酶抑制劑	含有	含有	含有	含有	含有	含有	不含	不含
磷酸酶抑制劑	含有	含有	含有	含有	含有	含有	不含	不含
主要用途	WB，IP	WB，IP	WB，IP，Co-IP	WB，IP，Co-IP	WB，IP，Co-IP	WB，ChIP	WB，IP	WB，IP，Co-IP

組織/細(xì)胞裂解液選擇說明：

a）對于普通的WB，IP，Co-IP，推薦使用WB/IP裂解液（# MP1504-100ML），經(jīng)此裂解所得的產(chǎn)物沒有非常粘滯的透明狀DNA團(tuán)塊形成，不必采用超聲處理等就可以非常理想地用于后續(xù)操作。另外，此裂解液裂解的產(chǎn)物也適合用于磷酸化蛋白的WB檢測。

b）對于某些特殊蛋白的IP，如果WB/IP裂解液（# MP1504-100ML）效果不理想，可嘗試用RIPA（強(qiáng)，中，弱）或NP-40裂解液。若發(fā)現(xiàn)IP背景很高，說明非特異性蛋白被沉淀下來，則需選用裂解強(qiáng)度較高的裂解液，如RIPA（強(qiáng)或中）。如果發(fā)現(xiàn)目的蛋白無法被沉淀下來，說明裂解液的強(qiáng)度過強(qiáng)，可使用較溫和的裂解液如RIPA（弱）或NP-40裂解液。

c）對于某些難溶解蛋白的WB，如果WB/IP裂解液（# MP1504-100ML）效果不理想，可嘗試使用裂解強(qiáng)度更高的裂解液如RIPA（強(qiáng)，中）或SDS裂解液。

d）對于特定用途需要自行添加特定抑制劑或不需添加抑制劑，可考慮選擇RIPA裂解液（強(qiáng)，無抑制劑）（# MP1507-100ML）或WB/IP裂解液（無抑制劑）（# MP1508-100ML），后者很多情況下兼容酶活性和生物小分子的檢測，具體兼容性如何請自行測試，我司無相應(yīng)數(shù)據(jù)提供。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。

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