一步式質(zhì)粒DNAout2.0
產(chǎn)品及特點 基于堿變性原理的質(zhì)粒小量制備（Miniprep）是分子克隆研究中zui常用的方法之一，其操作包括三種溶液處理，一般需要30分鐘左右的時間才能得到可以上柱的質(zhì)粒DNA初提液。本產(chǎn)品采用天澤基因自主開發(fā)的一步式細菌裂解技術(shù)，只需要一種溶液處理即可以完成細菌裂解，并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。本產(chǎn)品的主要特點是:
1. 一步式裂解細菌，比傳統(tǒng)的堿變性方法更快捷。
2. 產(chǎn)量跟經(jīng)典堿變性法相當或更高，產(chǎn)率一般為3-5 ug 質(zhì)粒DNA/mL飽和菌液（對高拷貝質(zhì)粒而言）。
3. DNA純度高，OD260/280一般在1.8左右，基因組DNA和RNA污染少。
4. 可以直接用于電泳、酶切、PCR、細菌轉(zhuǎn)化、分子克隆、測序等實驗。
5. 重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
規(guī)格及成分 成份 50次大紙盒包裝 100次大紙盒包裝
溶液A（CAT#:70903A） 50 mL 100 mL
離心吸附柱（CAT#:90303） 50只 100只
離心吸附柱收集管（CAT#:90511） 50只 100只
通用預(yù)洗液（CAT#:70903B） 50mL 100 mL
通用洗柱液（CAT#:60408） 100 mL 200 mL
DNA洗脫液2.0（CAT#:111205） 10 mL 10 mL
使用手冊 1份 1份

運輸及保存 常溫運輸及保存（溶液A需要 4℃保存），有效期一年。
自備試劑 無
使用方法 1. 用塑料離心管收集不超過3 mL過夜培養(yǎng)飽和菌液，室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄上清。注意:不能超過3mL菌液，否則質(zhì)粒回收率將急劇降低。
2. 加入0.6-1 mL溶液A（用前需搖勻），充分吹打或振蕩裂解細菌直到裂解變澄清，一般需要半分鐘左右。注:此方法不同于堿裂解法，故可以充分吹打。
3. 將裂解液全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫靜置2分鐘使質(zhì)粒DNA與膜結(jié)合。室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄穿透液。如果一次不能將上清全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，可以分兩次進行。
4. 在離心吸附柱中加入0.7 mL的通用預(yù)洗液，室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄穿透液。注意: 如果通用預(yù)洗液放置在低溫產(chǎn)生了沉淀，用前需要加熱到60℃左右使之融化，混勻后再用。
5. 再在離心吸附柱中加入0.3 mL的通用預(yù)洗液，室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄穿透液。此步預(yù)洗別省略，否則DNA純度不高。
6. 在離心吸附柱中加入0.7 mL的通用洗柱液，室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄穿透液。
7. 再在離心吸附柱中加入0.7 mL的通用洗柱液，室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄穿透液。此為第二次洗滌。
8. 再在離心吸附柱中加入0.4 mL的通用洗柱液，室溫12000-15000 g離心半分鐘，棄穿透液。此為第三次洗滌，如果不洗滌三次，zui后得到的質(zhì)粒DNA的OD260和280的比值達不到1.8。
9. 室溫12000-15000 g離心半分鐘，甩干殘留液體。注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響后續(xù)的電泳上樣（DNA沉不到加樣孔里去）和酶反應(yīng)。
10. 將離心柱置于一個新的1.5 mL自備塑料離心管中，加入30-100 uL DNA洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。如果將DNA洗脫液2.0預(yù)熱到65-80℃，則效果更好。
11. 室溫12000-15000 g離心半分鐘，離心管底溶液即質(zhì)粒DNA，可以直接用于后續(xù)實驗或放冰箱長期保存。
注意：如果需要去除DNA樣品中的內(nèi)毒素，請使用天澤基因的液相內(nèi)毒素清除劑。