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雜交液的配制

時(shí)間:2013-1-16閱讀:515
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雜交液的配制_www.shysbio.com

雜交液所含成分除大約2.5 ng/ul的標(biāo)記探針DNA外,還包括:50%甲酰胺,是解雙螺旋的分子,會破壞氫鍵的形成,促進(jìn)DNA和探針變性后,進(jìn)行雜交;10%硫酸葡聚糖,形成探針混合液基質(zhì),對DNA有濃縮作用,可提高雜交的反應(yīng)速度10倍以上,但不影響探針的洗脫強(qiáng)度;雜交時(shí)常用濃度為5%~10%,但濃度高時(shí)會使溶液的粘度增大,不利雜交探針的滲透。0.1SDS,它有助于探針的滲透;2×SSC,作為調(diào)節(jié)探針洗脫強(qiáng)度的緩沖液;封阻DNA:濃度通常為探針DNA的1~100倍,作用是雜交掉探針中的相似序列,阻止探針DNA與非目標(biāo)DNA的粘連,即用于阻止探針與非特異位點(diǎn)或非目標(biāo)DNA雜交。

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