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歐洲放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提

時間:2022/9/27閱讀:326
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歐洲放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

2 RNA質量檢測

1)紫外吸收法測定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

① 濃度測定

A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

APOJ載脂蛋白J抗體

APOH載脂蛋白H抗體

ART4二磷酸腺苷核糖基轉移酶4抗體

AKIRIN2AKIRIN2蛋白抗體

ARL8BADP核糖基化樣因子8B抗體

ATAD2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體

AKIRIN1AKIRIN1蛋白抗體

ASZ1錨定蛋白樣蛋白1抗體

Adenylate kinase 2腺苷酸激酶2抗體

Acrosin精子頂體前體蛋白抗體

AIM1L黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體

AER61未知糖基化轉移酶AER61抗體

FE65鐵蛋白Fe65抗體

ARHI抑癌基因ras同源家族1抗體

AP2 alpha轉錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體

ANP心鈉素抗體

AARS2丙氨酰tRNA合成酶2抗體

Alpha-Synuclein核突觸蛋白α抗體

APG4B自噬相關蛋白4B抗體

alpha Actinin 4-Loading Controlα-輔肌動蛋白4(內參)抗體

Alkaline Phosphatase堿性磷酸酶抗體

AU1 tagAU1 tag標簽抗體

AEBP1脂肪細胞增強結合蛋白1

AKT1蛋白激酶B

AKT1蛋白激酶B

ANGL2血管生成素樣蛋白2抗體

Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗體

Annexin I膜粘連蛋白 I抗體


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