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人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒

閱讀:156發布時間:2014-11-18

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    研域(上海)化學試劑有限公司

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人ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人骨成型蛋白2(BMP-2)水平。用純化的人骨成型蛋白2(BMP-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入骨成型蛋白2(BMP-2),再與HRP 標記的骨成型蛋白2(BMP-2)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨成型蛋白2(BMP-2)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人骨成型蛋白2(BMP-2)濃度。

人ELISA試劑盒樣本處理及要求:

1.血清:室溫血液自然凝固10-20 分鐘,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3.尿液:用無菌管收集,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

 


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