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人P27蛋白（P27）ELISA試劑盒的實驗原理

閱讀：564發布時間：2011-4-11

人P27蛋白（P27）ELISA試劑盒實驗原理

1． 采用雙抗體夾心法測定標本中人P27蛋白（P27）ELISAKit水平。

2. 首先用純化的人P27蛋白（P27）ELISAKit抗體包被微孔板，制成固相抗體。

3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入P27蛋白（P27）ELISAKit，再與HRP標記的P27蛋白（P27）ELISAKit抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。

4. 顏色的深淺和樣品中的P27蛋白（P27）ELISAKit呈正相關。

5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算出樣品中人P27蛋白（P27）ELISAKit濃度

。

目的：測定人的血清，血漿及相關液體樣本中P27蛋白（P27）ELISAKit的含量。

 

6. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。

7. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）去除顆粒。仔細收集上清，如有沉淀，再次離心。


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