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即用型評(píng)板培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)加樣的方法

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即用型評(píng)板培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)加樣的方法
臨床ELISA試劑盒測(cè)定現(xiàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測(cè)定模式,ELISA試劑盒測(cè)定操作非常簡(jiǎn)單,一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面,ELISA試劑盒其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁加入,應(yīng)注意角度太小,會(huì)使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確;吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處!
目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測(cè)的血清標(biāo)本的收集則沒有時(shí)間和體位方面的影響,用于ELISA試劑盒測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),有時(shí)由于特定的檢測(cè)目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集,要留意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。再如治療藥物的檢測(cè),應(yīng)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)選擇服藥后的zui適時(shí)間抽血檢測(cè)。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r(shí),血清中腎素活性將泛起顯著增高。如可的松在早晨4~6點(diǎn)之間,會(huì)有一峰值泛起:生長(zhǎng)激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式開釋,因此,在測(cè)定此類激素時(shí),有必要在緊密親密相連的時(shí)間距離內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測(cè)定值。只是在處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面:首先要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。ELISA試劑盒樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,應(yīng)在-70 ℃以下。樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
即用型評(píng)板培養(yǎng)基兔組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒    Rabbit Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit
兔子組織因子(TF)免疫試劑盒    Rabbit Tissue factor,TF ELISA Kit
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒    Rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit
兔子組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒    Rabbit Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit
兔子組胺(HIS)免疫試劑盒    Rabbit Histamine,HIS ELISA Kit
兔子總堿性磷酸酶(TALP)免疫試劑盒    Rabbit total alkaline phosphatase,TALP ELISA Kit
兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒    Rabbit Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒    Rabbit TRAIL-R3 ELISA Kit
兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒    Rabbit Tumor necrosis factor α,TNFα ELISA Kit
兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)免疫試劑盒    Rabbit neutrophil elastase ELISA Kit
兔子脂聯(lián)素(ADP)免疫試劑盒    Rabbit adiponectin,ADP ELISA Kit
兔子脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒    Rabbit Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒    Rabbit lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
兔子粘蛋白1(MUC1)免疫試劑盒    Rabbit Mucin 1,MUC1 ELISA Kit
兔子載脂蛋白B48(apo-B48)免疫試劑盒    Rabbit Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit
兔子孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒    Rabbit Progesterone,PROG ELISA Kit
兔子游離脂肪酸(FFA)免疫試劑盒    Rabbit Free Fatty Acids,FFA ELISA Kit
兔子硬骨素(SOST)免疫試劑盒    Rabbit Sclerostin,SOST ELISA Kit
兔子胰高血糖素(GC)免疫試劑盒    Rabbit Glucagon,GC ELISA Kit
兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)免疫試劑盒    Rabbit Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit
兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒    Rabbit Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
兔子胰島素(INS)免疫試劑盒    Rabbit Insulin,INS ELISA Kit
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒    Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit即用型評(píng)板培養(yǎng)基

 


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