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武漢艾美捷科技有限公司
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閱讀：326發布時間：2021-4-7
雙尾RT-qPCR是什么呢？它是一種基于PCR法的miRNA定量檢測試劑盒。那么，就先從傳統microRNA PCR檢測法的痛點說起吧~
傳統的PCR法檢測microRNA，兩個常規PCR引物的總長度幾乎是microRNA長度的兩倍，因此不適合于做miRNA的引物。以前的技術通過使用發夾引物延伸microRNA，添加poly A尾巴或通過連接添加片段來解決這個問題，但是這會降低檢測的靈敏度和特異性。此外，這些方法無法檢測在3'末端修飾的microRNA，因為它會干擾延伸過程。
好了，說到這里，在鄭重向大家介紹這款名為雙尾RT-qPCR技術。它的原理如下：
與使用單個結合探針不同，雙尾PCR使用兩個半探針，它們分別結合到不同的microRNA丨片段上，這些片段通過折疊的系鏈連接。雖然每個半探針本身都很短, 無法結合到microRNA上，但當兩個半探針互補時，它們會協同結合，這種結合的特異性是非常高的，因為在短半探針中錯配的影響非常大。然后可以使用兩個特定序列引物對形成的cDNA進行PCR擴增，用SYBR進行檢測。
怎么樣，有沒有明白一點了，那么接下來，了解一下它的優勢吧！
1.高靈敏度：zui多少于10個分子；
2.高特異性
適合于多種樣本（血漿/血清，血液，組織等）中的miRNA檢測和定量
通過折疊的系鏈連接的兩個半探針（結合不同的microRNA丨片段）
動態范圍廣（高達9 log）
在進行單重qPCR之前，可進行雙管多重RT-PCR
提供定制化服務
高靈敏度及特異性：
1）5´互補片段顯著提高分析的靈敏度：
2）5´ 互補片段顯著提高檢測的特異性：
適用樣本類型豐富：
檢測流程簡便：
文章來源：艾美捷科技
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