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武漢艾美捷科技有限公司
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閱讀:238發布時間:2020-6-19
蛋白定量即蛋白質定量,蛋白質定量根據其目的可分為全蛋白質的“總定量法”和特定蛋白質的“個別定量法”。 蛋白定量是生物學實驗*的一部分。
為驗證細胞裂解是否成功,或為了將多個樣品進行平行實驗比較或標準化保存,需對細胞裂解液進行蛋白定量;為了判定蛋白的產量,需對純化好的蛋白進行定量;為了將純化好的蛋白用*或者報告酶進行標記,同樣需首先對蛋白樣品進行定量,以保證標記反應在適當的化學濃度下進行。 蛋白質的定量分析是生物化學和其他生命學科員常涉及的分析內容。在生化實驗中,對樣品中的蛋白質進行準確可靠的定量分析,是經常進行的一項非常重要的工作。蛋白質是一種十分重要的生物大分子,它的種類很多,結構不均一,分子量又相差很大,功能各異,這樣就給建立一個理想而又通用的蛋白質定量分析的方法帶來了許多具體的因難。 蛋白定量的測試方法有很多種,其中較為常見的有五種,分別是Bradford法、Bradford斑點試驗、Coomassie 斑點試驗、紫外分光度檢測法及BCA法這五種。當然,每種方法適用的情況都有所不同。 蛋白定量ECL高敏試劑盒,貨號:K22020 蛋白定量ECL超敏試劑盒,貨號:K22030 蛋白定量BCA法試劑盒,貨號:KTD3001 蛋白定量Bradford法試劑盒,貨號:KTD3002 彩色預染蛋白質Marker (10-180 kDa),貨號:BMM3001 Bradford法: 該方法用于大多數蛋白質定量是相當精確的,特別是用于小分子多肽定量。如核糖核酸酶或*等。但是,去污劑的濃度超過0.2%則影響定量結果。如TritonX-100,SDS,NP-40等。 BCA法: BCA法特點: 1、靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl 。 2、測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。 3、 在20-2000μg/ml濃度范圍內有良好的線性關系。 4、 檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。 5.、受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響:EDTA小于10mM。DTT小于1mM巰基乙醇低于1mm。 |
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