首先ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)*步是加樣
在ELISA試劑盒中除了包被外，一般需進(jìn)行45加樣。在定性測定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣一滴。此時(shí)應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。
Elisa試劑盒第二步保溫
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的，傳熱容易。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中，以平衡溫度，這在室溫較低時(shí)更為重要。加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上，以便不時(shí)觀察，待對照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)
其次Elisa試劑盒的洗滌也是非常關(guān)鍵的
洗滌在ELISA試劑盒過程中不是反應(yīng)聚，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯待塑料對蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在ELISA試劑盒測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯一類物質(zhì)即右達(dá)到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水*脂肪酸酯，為非離子型的表面張力物質(zhì)，常作為助溶劑。根據(jù)脂肪酸的種類而對聚山梨酯編號，結(jié)合月桂酸的為聚山梨酯20，在ELISA中zui為常用。它的洗滌效果好，并具有減少非特異性吸附和增強(qiáng)抗原抗體結(jié)合的作用。
洗滌如不*，特別在zui后一次，如有酶結(jié)合物的非特異性吸附，將使空白值升高。另外，在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標(biāo)抗體作用而產(chǎn)生干擾。
Annexin A1 膜粘連蛋白A1抗體
ATG1/ULK1 自噬相關(guān)蛋白1抗體
beta Amyloid 1-16 β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體
APCDD1 腺瘤肉調(diào)節(jié)蛋白抗體
APPL1 銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體
AQP7 水通道蛋白-7抗體
ALT1/Alanine Transaminase 谷*氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體
ARHG7 p21活化蛋白激酶ARHG7抗體
phospho-APE(Ser1417) 磷酸化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體
ADO 2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體
Angiotensin II Type 1 Receptor 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
ADORA2B 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體
ADAM19 去整合素樣金屬蛋白酶19抗體
AF 4 protein 原癌基因AF4蛋白抗體
ADAMTSL1 整合素樣金屬蛋白酶與*樣1蛋白抗體
ADAMTSL2 整合素樣金屬蛋白酶與*樣2蛋白抗體
ADAMTSL3 整合素樣金屬蛋白酶與*樣3蛋白抗體
ADAM20 去整合素樣金屬蛋白酶20抗體
ELISA試劑盒
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