1.ELISA灌流式培養是把細胞和培養基一起加入反應器后，在細胞增長和產物形成過程中，不斷地將部分條件培養基取出，同時又連續不斷地灌注新的培養基。它與半連續式操作的不同之處在于取出部分條件培養基時，絕大部分細胞均保留在反應器內，而半連續培養在取培養物時同時也取出了部分細胞。 灌流式培養常使用的生物反應器主要有兩種形式。一種是用攪拌式生物反應器懸浮培養細胞，這種反應器必須具有細胞截流裝置，細胞截留系統開始多采用微孔膜過濾或旋轉膜系統，zui近開發的有各種形式的沉降系統或透析系統。 中空纖維生物反應器是連續灌流操作常用的一種。它采用的中空纖維半透膜，透過小分子量的產物和底物，截流細胞和分子量較大的產物，在連續灌流過程中將絕大部分細胞截留在反應器內；近年來中空纖維生物反應器被廣泛應用于產物分泌性動物細胞的，主要用于培養雜交瘤細胞單克隆抗體。 另外一種形式是固定床或流化床生物反應器，固定床是在反應器中裝配固定的籃筐，中間裝填聚脂纖維載體，細胞可附著在載體上生長，也可固定在載體纖維之間，靠上攪拌中產生的負壓，迫使培養基不斷流經填料，有利于營養成分和氧的傳遞，這種形式的灌流速度較大，細胞在載體中高密度生長。流化床生物反應器是通過流體的上升運動使固體顆粒維持在懸浮狀態進行反應，適合于固定化細胞的培養。
2.灌流式培養的優點：
·細胞截流系統可使細胞或酶保留在反應器內，維持較高的細胞密度，一般可達107-109/ml，從而較大的提高了產品的產量；
·連續灌流系統，使細胞穩定的處在較好的的營養環境中，有害代謝廢物濃度積累較低；
·反應速率容易控制，培養周期較長，可提高率，目標產品回收率高；
·產品在罐內停留時間短，可及時回收到低溫下保存，有利于保持產品的活性。 連續灌注培養是近年用于動物細胞培養分泌型重組治療性藥物和嵌合抗體及人源化抗體等基因工程抗體較為推崇的一種方式。應用連續灌流工藝的公司有Genzyme, Genetic Institute, Bayer公司等。這種方法zui大困難是污染機率較高，長期培養中細胞分泌產品的穩定性，規模放大過程中工程問題。
五、細胞工廠培養
ELISA細胞工廠（cell factory）是一種設計精巧的細胞培養裝置。它在有限的空間內利用了zui大限度的培養表面，從而節省了大量的廠房空間,并可節省貴重的培養液。更重要的是，它可有效地保證操作的無菌性，從而避免因污染而帶來的原料、勞務和時間損失。它是對傳統轉瓶培養的革命。 丹麥NUNC公司的NUNC細胞工廠是目前應用較多的細胞工廠系統。可用于如疫苗、單克隆抗體或生物制藥等工業規模，特別適合于貼壁細胞，也可用于懸浮培養，在從實驗室規模進行放大時不會改變細胞生長的動力學條件，可提供1，2，10和40盤的規格使放大變得簡單易行，低污染風險，節省空間，培養表面經測試保證zui有利于細胞貼附和生長。同時，與NUNC的細胞工廠操作儀結合使用，可全面實現細胞培養的自動化，從而大大地減低勞動強度和密集度。 這套系統使用很方便，可產生類似塑料培養瓶的效果。由組織培養級聚笨乙烯制成，使用后可隨意處理。其zui大缺點是：經*消化后，很難將細胞*洗出。
