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技術(shù)文章

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟

閱讀:253發(fā)布時(shí)間:2015-9-28

1.瘤細(xì)胞懸液接種 
elisa試劑盒 (1)無菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞。 
(2)在PBS中將瘤*碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液。
(3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍。
(4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml。
(5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些。
(6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,zui后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。
2.腹水瘤的建立與腹水瘤的接種 將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹elisa試劑盒水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí),腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。
(1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
(2)消毒動(dòng)物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞。
(3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號(hào)針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml。
elisa試劑盒(4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?br>

KIF1B 驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1B抗體
katanin p80 劍蛋白p80抗體
KIRREL1 腎病樣蛋白1抗體
SETDB1 組蛋白H3K9甲基轉(zhuǎn)移酶4抗體
KCNE3 鉀離子通道蛋白家族成員3抗體
Keratin82 角蛋白82抗體
C20orf19 20號(hào)染色體開放閱讀框19抗體
Keratocan 細(xì)胞角膜蛋白多糖抗體
KRCC1 含賴氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體
Prostate Specific Antigen *3/*3抗體
KLF1, 2, 4 上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體
KLF4 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體
KSR1 Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體
KLH 血藍(lán)蛋白抗體
KRIT1 腦海綿狀血管畸形蛋白1抗體
KBP KBP蛋白抗體
kappa Opioid receptor kappa型阿片受體抗體
Kininogen-1 heavy chain 激肽原1重鏈抗體


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