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細胞培養常見問題和解決方法

閱讀：362發布時間：2015-1-8

    細胞培養技術是指在動植物體外生長,并不再形成組織。培養物一般為細胞群,也可以是單個細胞,近年來,其已經成為很多生物制品的主要材料,并廣泛應用于醫學病理研究,本文針對細胞培養存在的一些常見問題進行分析研究并提出相應防控措施,現總結如下。

問題1：培養液pH值變化太快

可能原因：

(1)CO2張力不對

(2)培養瓶蓋擰得太緊

(3)NaHCO3緩沖系統緩沖力不足

(4)培養液中鹽濃度不正確

(5)細菌、酵母或真菌污染

建議解決方法：

(1)按培養液中NaHCO3濃度增加或減少培養箱內CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。

(2)松開瓶蓋1/4圈。

(3)改用不依賴CO2培養液。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度。

(4)在CO2培養環境中改用基于Earle′s鹽配制的培養液，在大氣培養環境中培養改用Hanks鹽配制的培養液。

(5)丟棄培養物，或用抗生素除菌。

問題2：培養液出現沉淀，但pH值不變

可能原因：

(1)洗滌劑清洗后殘留有磷酸鹽，將培養基成分沉淀下來

(2)冰凍保存培養液

建議解決方法：

(1)用去離子水反復沖洗玻璃器皿，然后滅菌。

(2)將培養液加熱到37℃，搖動使其溶解如沉淀仍然存在，丟棄培養液。

問題3：培養液出現沉淀，同時pH發生變化

可能原因：

細菌或真菌污染

建議解決方法：

丟棄培養物，或用抗生素除菌。



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