好爽又高潮了毛片免费下载,国产97在线 | 亚洲,亚洲一区二区三区AV无码,特级AAAAAAAAA毛片免费视频

行業(yè)產(chǎn)品

  • 行業(yè)產(chǎn)品

上海麗臣商貿(mào)有限公司


當(dāng)前位置：上海麗臣商貿(mào)有限公司>技術(shù)文章>聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE膠的制備過程

經(jīng)營(yíng)模式：經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品：1067條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：王經(jīng)理 （銷售）

技術(shù)文章

聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE膠的制備過程

閱讀：571發(fā)布時(shí)間：2014-6-30

 

聚丙烯酰胺凝膠電泳 可用于蛋白和寡核苷酸的分離，zui常用于蛋白質(zhì)的分離，這里總結(jié)了DNA電泳的各種濃度PAGE膠配制的配方及制備方法。

聚丙烯酰胺 凝膠電泳簡(jiǎn)稱為PAGE（Polyacrylamide gel electrophoresis），是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)。聚丙烯酰胺凝膠是由單體的丙烯酰胺（CH2=CHCONH2 Acrylamide）和甲叉雙丙烯酰胺（CH2(NHCOHC=CH2) 2 N,N'-methylenebisacrylamide）聚合而成，這一聚合過程需要有自由基催化完成。

各種濃度PAGE膠的配制(DNA電泳用)

50ml體系：

丙烯酰胺有效分離（bp)二甲苯青溴酚藍(lán)丙烯酰胺30%（ml）10×TBE（ml)ddH2O（ml）TEMED（µl）過硫酸銨10%（µl）
3.5%100-10004601005.83539.1725.0250
5.0%100-500260658.33536.6725.0250
8.0%60-4001604513.33531.6725.0250
12.0%40-200702020.0525.0025.0250
15.0%25-150601525.0520.0025.0250
20.0%5-100451233.33511.6725.0250

5ml體系：

丙烯酰胺丙烯酰胺30%
（ml）		10×TBE
（ml）		ddH2O
（µl）		TEMED
（µl）		過硫酸銨10%
（µl）
3.5%0.5830.53.9172.525
5.0%0.8330.53.6672.525
8.0%1.3330.53.1672.525
12.0%2.000.52.52.525
15.0%2.500.52.02.525
20.0%3.3330.51.1672.525

1、丙烯酰胺30%為29：1(質(zhì)量比，丙烯酰胺：雙甲叉丙烯酰胺)

2、TEMED 可以加到1ul/ml。

不同濃度丙烯酰胺和DNA的有效分離范圍表

丙烯酰胺(%)有效分離范圍(bp)溴酚蘭*二甲苯青*
3.5100～2000100460
5.080～50065260
8.060～40045160
12.040～2003070
15.025～1501560
20.010～1001245

*表中給出的數(shù)字為與指示劑遷移率相等的雙鏈DNA分子 所含堿基對(duì)數(shù)目(bp).

凝膠的制備過程：

1、 按要求裝配好垂直電泳板，兩塊玻璃板的兩側(cè)及底部用1%的瓊脂糖封邊，防止封閉不嚴(yán)而使聚丙烯酰胺液漏出。

2、 將裝好的玻璃電泳板傾斜成45～60℃角。

3、 按表3配制所需%濃度凝膠的毫升數(shù)。

4、 加入TEMED后，立即混勻，緩緩倒入兩玻璃板間的膠床中，直到液體接近溢出時(shí)為止。

5、 立即插入適當(dāng)?shù)氖嶙樱芮凶⒁夥乐故猃X下產(chǎn)生氣泡，用一有力的夾將梳子夾在一邊的玻璃板上，然后將玻璃板斜靠在物體上，使成10°角，可減少液體泄漏的機(jī)會(huì)。

6、 室溫聚合一小時(shí)后，將玻璃板插入電泳槽中，上緊，倒入0.1XTBE緩沖液。

7、 小心取出梳子，加樣。

大家可以根據(jù)自己試驗(yàn)中DNA片段大小的不同選擇配制合適濃度的丙烯酰胺膠。PAGE膠配制過程中記得避免氣泡的產(chǎn)生。


智慧城市網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.cmr6829.com,All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，智慧城市網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~