細胞:HFLS-RA細胞
中文名稱:人類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)

內(nèi)毒素所致SIRSMODS小鼠脾細胞損傷的形態(tài)學觀察
目的應用大腸桿菌內(nèi)毒素脂多糖(LPS)腹腔注射制備小鼠全身炎癥反應綜合征/多器官功能失常綜合征(SIRS/MODS)模型.
方法:
用免疫組化的方法檢測了Bcl-2的表達.
結(jié)果隨LPS作用時間的延長,脾損傷逐漸加重.HE染色中,生發(fā)中心和動脈周圍淋巴鞘分別在LPS注射后9小時和18小時出現(xiàn)大量深淺不一的顆粒狀細胞碎片.
TUNEL陽性染色細胞隨時間延長而增多.電鏡下可見到凋亡的淋巴細胞.在18小時還見到細胞壞死現(xiàn)象.
Bcl-2的表達隨著LPS作用時間的延長而明顯下降,與TUNEL染色的相關(guān)分析表明,Bcl-2的表達與細胞凋亡有顯著的負相關(guān).
結(jié)論在LPS所致的SIRS/MODS模型中,脾細胞損傷以凋亡為主,隨LPS作用時間延長而加重,在晚期還會出現(xiàn)細胞壞死.Bcl-2參與了LPS引起的脾細胞凋亡效應.