人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞傳代細(xì)胞 細(xì)胞信息（說明書，鑒定書),售后情況，細(xì)胞活動(dòng)請(qǐng) :
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：tongpaibio 提供耐藥細(xì)胞株，細(xì)胞染色等技術(shù)服務(wù)。
復(fù)蘇細(xì)胞下單后的1-2周內(nèi)到貨，凍存細(xì)胞2天內(nèi)到貨
多孔塑料培養(yǎng)板單細(xì)胞克隆法：
消化：取健康待克隆細(xì)胞，吸出瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，加消化液。
低密度細(xì)胞懸液的制備：做克隆細(xì)胞時(shí)首先需先用消化法制備出分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，然后稀釋細(xì)胞,使之成為1~2細(xì)胞/毫升懸液，zui適宜細(xì)胞密度為 1~2 細(xì)胞/ml 培養(yǎng)液。
接種：先用吸管輕輕吹打細(xì)胞懸液，使混懸均勻，繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)
加0.5毫升。接種時(shí)要迅速準(zhǔn)確，爭(zhēng)取在zui短時(shí)間內(nèi)加完，以免培養(yǎng)液蒸發(fā)，然后迅速蓋好
蓋板，置CO2溫箱培養(yǎng)。
標(biāo)記：培養(yǎng)6~12小時(shí)后，待細(xì)胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后，從溫箱中取出，置
倒置光顯微鏡臺(tái)上，觀察和標(biāo)記下含有單個(gè)細(xì)胞的孔，置 CO2 溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無
需換液，只有在細(xì)胞增長(zhǎng)過于緩慢時(shí)才可進(jìn)行換液。換液時(shí)先吸除舊培養(yǎng)基，但不要吸除過
多，余少許，以免細(xì)胞干涸。然后再迅速補(bǔ)加新鮮克隆培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng) 3~4 周。待孔內(nèi)細(xì)
胞增至500~600個(gè)時(shí)，可進(jìn)行分離培養(yǎng)。
人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞傳代細(xì)胞 分離擴(kuò)大培養(yǎng):培養(yǎng)86~96小時(shí)后進(jìn)行觀察。挑選生長(zhǎng)良好的單細(xì)胞克隆孔，先吸
除舊培養(yǎng)液，用Hanks洗1~2次，繼加胰蛋白酶少許，加入量已能覆蓋細(xì)胞群即可，如過
多，應(yīng)吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視，待發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓時(shí)，加入0.1ml含 10%血
清的克隆培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打,當(dāng)細(xì)胞離開底物懸浮后,一并吸入管內(nèi)，移入另瓶或皿
中，再補(bǔ)加一定量克隆培養(yǎng)液,置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng).增殖.使之形成新的細(xì)胞群后，
即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
必須保證分離出來的細(xì)胞確為一個(gè)而不是兩個(gè)或更多。因此必須提高克隆形成率才易克隆成功，為此常采取以下一些措施：使用適應(yīng)性培養(yǎng)基或條件培養(yǎng)基（Conditional Medium）。制備方法：
培養(yǎng)同源細(xì)胞（未克隆前時(shí)的同一細(xì)胞）至半?yún)R合狀態(tài)時(shí)，更換一次培養(yǎng)液，再繼續(xù)培養(yǎng) 24~48 小時(shí)后，吸出所有培養(yǎng)液。
離心：3000~4000/分離心 10 分鐘，吸取上清液。濾過：再經(jīng)直徑 0.22μm 濾孔的濾膜過濾，低溫凍存貯備用；用時(shí)取 1 分適應(yīng)培養(yǎng)基+2 分培養(yǎng)基混合使用。使用飼細(xì)胞(Feeder Cells)。制備方法：
人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞傳代細(xì)胞 取原代培養(yǎng)的人或動(dòng)物胚胎成纖維細(xì)胞，90%匯合時(shí)制成細(xì)胞懸液，再按 105 細(xì)胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
在細(xì)胞半?yún)R合時(shí)，準(zhǔn)備 0.25μg/ml 的絲裂霉素 C，按 2μg/106 細(xì)胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過夜；或用射線單次照射，劑量 30～50 戈瑞。細(xì)胞經(jīng)上述處理后，Hanks 液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng) 24 小時(shí)，胰蛋白酶消化細(xì)胞制成懸液，按 5×104（104 細(xì)胞/cm2）接種入新培養(yǎng)基中。 48 小時(shí)后，即可用于細(xì)胞克隆之用。
底物特殊處理：
制備濃度為 1 mg/ml 的多聚右旋賴氨酸的水溶液，用以濕潤(rùn)培養(yǎng)瓶底。倒出多聚賴氨酸溶液，用 5ml PBS 沖洗一次后，可立即使用，或存數(shù)周內(nèi)使用。
細(xì)胞詳細(xì)信息：
HEL細(xì)胞 ：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004897410.html
HEK-2細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004897355.html
HEC-1-B細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004897328.html
HEC-1-A細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004897248.html
HCT-8細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004897194.html
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HCT116細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004897007.html
Hce-8693細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004896863.html
HCCLM3細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004896764.html
HCCC-9810細(xì)胞 ：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004896667.html
HCC-94細(xì)胞：http://www.tongpaiyz。。ｃｏｍ/shopdetail/product/20150521-2004895187.html
人肺腺癌細(xì)胞 Calu-3細(xì)胞
人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞 SL-1細(xì)胞
人支氣管上皮樣細(xì)胞 BEAS-2B細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞 HEL-2細(xì)胞
人肺鱗癌細(xì)胞 NCI-H226細(xì)胞
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 AE1201細(xì)胞
人胚肺細(xì)胞系 KuMA細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞 HEL-1細(xì)胞
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 DMS 153細(xì)胞
人肺細(xì)胞 HLF-a細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞 KMB-17細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞 2BS細(xì)胞
人胚胎肺成纖維細(xì)胞 WI-38細(xì)胞
人胚胎氣管組織來源細(xì)胞 CCC-HBE-2細(xì)胞
人胚肺成纖維細(xì)胞 CCC-HPF-1細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞--MRC-5細(xì)胞 細(xì)胞株
人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5細(xì)胞 細(xì)胞株
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H209細(xì)胞
人低分化肺腺癌細(xì)胞 GLC-82細(xì)胞
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H446細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 NCI-H157細(xì)胞
人肺鱗癌細(xì)胞 NCI-H520細(xì)胞
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株 PG-BE1細(xì)胞
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株 PG-LH7細(xì)胞
人肺癌細(xì)胞 A-427細(xì)胞
人低分化肺腺癌細(xì)胞 SK-LU-1細(xì)胞
人肺支氣管癌細(xì)胞 NCI-H1650細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 NCI-H1975細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 NCI-H2087細(xì)胞
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H2227細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H23細(xì)胞
人肺腺鱗癌細(xì)胞 NCI-H596細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H838細(xì)胞
人肺鱗癌細(xì)胞 LTEP-s細(xì)胞
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 LTEP-sm細(xì)胞
人肺鱗癌瘤株 LTEP-s細(xì)胞
人肺鱗癌細(xì)胞 NCI-H1703細(xì)胞
人肺鱗癌細(xì)胞 NCI-H2170細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H524細(xì)胞
人肺腺癌細(xì)胞 SPC-A1細(xì)胞
人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H125細(xì)胞
人肺癌細(xì)胞 H1299細(xì)胞
人肺癌細(xì)胞 TKB-1細(xì)胞
人肺腺癌細(xì)胞，LTEP-a-2細(xì)胞
